細胞破碎機的細胞粉碎技術是怎樣的?
發布時間:2021-09-24 點擊次數:465次
細胞破碎機的細胞粉碎技術是怎樣的?
細胞破碎機的細胞分裂技術是指利用外力破壞細胞膜和細胞壁,使細胞內容物釋放目的產物成分的技術。細胞破碎分離純化某些蛋白質時,先要將蛋白質從組織或細胞中釋放出來,保持原有的自然狀態,以免失去活性。因此,細胞破碎機要用適當的方法粉碎組織和細胞。不同生物體或同一生物體不同部位的組織,細胞容易破碎,使用方法也不同。例如,動物器官的細胞膜比較脆弱,容易破碎,植物和微生物被用于由比較堅固的纖維素和半纖維素組成的細胞壁。
細胞粉碎技術是利用外力破壞細胞膜和細胞壁,使細胞內容物釋放目的產物成分的技術,是分離純化細胞內合成的非分泌型生化物質(產品)的基礎。結合重組DNA技術和組織培養技術的重大發展,蛋白質可以大規模生產。
細胞破碎機的粉碎方法可以規定為機械法和非機械法兩大類。
高壓均質機是常用設備,由產生高壓的正向替代泵(positive displacenemt pump)和排放閥(discharge valve)組成,排放閥有可調整大小的狹窄孔。細胞漿通過逆閥進入泵內,在高壓下,從排出閥門的小孔中高速跳出來,射進沖擊圈,突然的減壓和高速沖擊使細胞被較高的液體剪切力打碎。在操作方式中,可以使用單通、均勻器或多通等,也可以連續操作。為了控制溫度上升,進口處可以用干冰調節溫度,使出口溫度控制在20左右。產業規模的細胞破裂中,酵母等難以破碎、濃度高或處于生長停止期的細胞。
將相同體積的少量組織樣品和能密封高密度ZircoBeads的2ml螺旋蓋微量管內,將緩沖液和穩定成分放入1.5ml的體積內,用6500RPM振動器高速休息8秒,8秒,再振動8秒即可。這種方法是目前較快、一次性處理較多樣品的方法。一臺機器一天可以處理2400個樣品。對小而多樣的人來說很方便。
高速攪拌珠研磨粉碎方法
研磨是將細胞懸浮液與玻璃珠、石英砂、氧化鋁等磨料快速混合在一起,粉碎細胞的一般方法。在工業規模的粉碎中,經常使用高速球磨機。超聲波破碎法(ultrasonication)
超聲波破碎法利用超聲波振蕩器發射的15-25kHz超聲波探頭處理細胞懸浮液。超聲波振蕩器有多種類型,一般為電音型,由發電機和換向器組成,發生器可以產生高頻電流,換向器的作用是將電磁振動轉換為機械振動。超聲波振蕩器直接插入兩種類型的介質,可以分為插槽和探針。