高壓細胞破碎儀廠家述細胞破碎的實驗室方法

　　高壓細胞破碎儀廠家講述隨著重組DNA技術得到廣泛應用以來，生物技術發生了質的飛躍。很多基固工程產物都是胞內物質，必須將細胞破壁。使產物得以釋放。才能進一步提取，因此細胞破碎是提取胞內產物的關鍵步驟。破碎方法的得當與否，直接影響到所提取產品的產量、質量和生產成本。
　　細胞破碎的實驗室方法可通過酶解法來實現，高壓細胞破碎儀廠家與您一起來探討：
　　酶解法利用不同水解酶，如溶菌酶、纖維素酶、蝸牛酶和酯酶等，于37℃，pH8，處理15分鐘，可以專一性地將細胞壁分解，釋放出細胞內含物，此法適用于多種微生物。例如從某些細菌細胞提取質粒DNA時，可采用溶菌酶（來自蛋清）破細胞壁，而在破酵母細胞時，常采用蝸牛酶（來自蝸牛），將酵母細胞懸于0.1mmol/L檸檬酸一磷酸氫二鈉緩沖液(pH=5.4)中，加1％蝸牛酶，在30℃處理30分鐘，即可使大部分細胞壁破裂，如同時加入0.2％疏基乙醇效果會更好。此法可以與研磨法聯合使用。
　　細胞培養和收集：將活化酵母菌株接入馬鈴薯培養基中，于30℃搖床培養。在對數生長期離心收集細胞，制成濕菌體。
　　細胞的破碎：
　　1.取5ml菌液懸液于10ml的1號試管中，再取1%的蝸牛酶于2號試管中。再取0.2%的疏基乙醇于3號試管中。
　　2.將三支都放入30℃的水浴中，預熱30s后，將裝有蝸牛酶的2號試管和裝有疏基乙醇的3號試管均倒入盛有菌液的試管中，在水浴中處理30分鐘。
　　3.取一滴菌液鏡檢。取5個視野數出破碎細胞的個數并算出平均值。對比各種方法的破碎細胞數量。