您知道高壓細胞破碎儀如何破碎細胞嗎?
發布時間:2017-08-23 點擊次數:1258次
高壓細胞破碎儀是生物工程及生物制藥等行業研發及生產的標準設備,可以破碎的目標有:酵母細胞破碎、大腸桿菌破碎、結核桿菌破壁、絲狀真菌破碎、人工倍體細胞破壁、動物細胞破碎、動物組織細胞破碎、Vero細胞破碎、植物細胞、藻類破碎等提取胞內蛋白及核酸等;高壓細胞破碎儀采用電機驅動,而非氣動方式,避免了空氣經壓縮產生的水份進入高壓泵,而導致高壓細胞破碎儀無法正常運行。
高壓細胞破碎儀如何進行細胞破碎?
1、高速組織搗碎:將材料配成稀糊狀液,放置于筒內約1/3體積,蓋緊筒蓋,將調速器先撥至zui慢處,開動開關后,逐步加速至所需速度。此法適用于動物內臟組織、植物肉質種子等。
2、玻璃勻漿器勻漿:先將剪碎的組織置于管中,再套入研桿來回研磨,上下移動,即可將細胞研碎,此法細胞破碎程度比高速組織搗碎機為高,適用于量少和動物臟器組織。
3、超聲波處理法:用一定功率的超聲波處理細胞懸液,使細胞急劇震蕩破裂,此法多適用于微生物材料,用大腸桿菌制備各種酶,常選用50-100毫克菌體/毫升濃度,在1KG至10KG頻率下處理10-15分鐘,此法的缺點是在處理過程會產生大量的熱,應采取相應降溫措施。對超聲波敏感和核酸應慎用。
4、反復凍融法:將細胞在-20度以下冰凍,室溫融解,反復幾次,由于細胞內冰粒形成和剩余細胞液的鹽濃度增高引起溶脹,使細胞結構破碎。
5、化學處理法:有些動物細胞,例如腫瘤細胞可采用十二烷基磺酸鈉、去氧膽酸鈉等細胞膜破壞,細菌細胞壁較厚,可采用溶菌酶處理效果更好。