高壓細胞破碎儀廠家分析細胞的高壓破碎
發布時間:2017-08-14 點擊次數:1227次
高壓細胞破碎儀廠家分析壓力破碎細胞(高壓均質)是使細胞內外的壓力升高,然后當樣品通過閥門流出,此時胞外的壓力突然降至常壓,而細胞內的壓力相對于胞外壓力降低的速度要慢得多,這樣就在細胞膜的內外形成一個很高的壓力差,在這個壓力差的作用下,細胞膜破裂。實際上在這個過程中還涉及液體剪切力、空穴的產生與復合,以及樣品流出時形成的湍流和沖擊力等。
早在之前就報道壓力破碎的效率與細胞的形狀和大小有關,棒狀的比球形的易破碎,而大的比小的易破碎。即使同樣是革蘭氏陽性菌,相互之間的破碎條件可能要相差好幾倍。不同樣品的壓力破碎條件有些細胞改變滲透壓就能破碎(如動物細胞和一些細菌),有些動物細胞只要在2000psi過一次,即可破碎好。而其它的細胞需要更大的強度。
高壓細胞破碎儀廠家解釋高壓破碎應該是破碎細胞的,如果目標分子很大,不能獲得滿意效果可以嘗試超聲破碎。超聲只是作為特殊情況下的補充,如樣品體積很小等。如果必須用超聲破碎,要注意,探頭不可太淺,如果很淺,超聲波能夠使樣品產生明顯的漩渦,容易產生大量的氣泡。目前實驗室破碎用超聲破頻率為20kHz,在水中傳播速度(20攝氏度)為1480m/s,波長約為7.4cm,共振長度為1.85cm,要避免超聲波與樣品產生共振。
高壓破碎是一個瞬間過程,樣品高速流出時的剪切力對二級結構破壞較強,對于超聲破碎而是一個持續過程,由于其熱效應的形成以及自由基的產生,會對目標分子產生多方面的影響,包括聚集、變性、降解等,作用機理相對復雜。無論是在細胞破碎還是乳化過程中,選擇合適的處理方法要根據目標分子的大小、結構穩定性、是否含有二硫鍵等信息綜合考慮。